lysozyme : mesure d’activité et purification
20 03 2014Sur cette séquence de 2 semaines,les objectifs pédagogiques sont:
– étudier les documents fournis et en faire une présentation à la classe (travail en groupe)
– être autonome pour prendre en compte le travail des autres groupes
– faire une synthèse des informations apportées par l’ensemble des groupes lors des exposés oraux ; extraire les informations utiles à la mise en œuvre de méthodes de purification du lysozyme du blanc d’œuf ou de la salive.
les connaissances théoriques à acquérir sont:
– la structure et la fonction du lysozyme de blanc d’œuf
– les propriétés physico-chimiques du lysozyme ( MM, pHi, structure spatiale….)
– la composition protéique du blanc d’œuf ( et un aperçu de l’hétérogénéité des protéines salivaires)
– la compréhension de la migration électrophorétique des protéines du blanc d’œuf dans les conditions expérimentales utilisées en AT
– la méthode de mesure d’une activité enzymatique sans pouvoir quantifier la concentration du substrat ou du produit en mol/L
– la compréhension et la mise en œuvre d’une purification d’enzyme: tableau de purification
– la compréhension et la mise en œuvre des méthodes chromatographiques et électrophorétiques
Documents fournis :
séance de 2 h : conception des exposés sur le lysozyme, la lysopaïne et le blanc d’œuf. lysozyme travail préliminaire
Travaux réalisés: (hors groupe 3 pas retrouvé…)
paroi bacterienne antoine fred dogan
Le lysozyme présentation Groupe phages
Activité de laboratoire:
Protocole AT1 :lysozyme AT1
Résultats des activités à exploiter par chacun pour son compte rendu:
résultats électrophorèse et gram
TP lysozyme spectro Ludo Fabien
étalonnage lysozyme puits masse
Utilisez ces documents pour rédiger le compte rendu à remettre jeudi 27 mars.
Bon courage à tous !
Tags : lysozyme purification