lysozyme : mesure d’activité et purification

20 03 2014

Sur cette séquence de 2 semaines,les objectifs pédagogiques sont:

– étudier les documents fournis et en faire une présentation à la classe (travail en groupe)

– être autonome pour prendre en compte le travail des autres groupes

– faire une synthèse des informations apportées par l’ensemble des groupes lors des exposés oraux ; extraire les informations utiles à la mise en œuvre de méthodes de purification du lysozyme du blanc d’œuf ou de la salive.

les connaissances théoriques à acquérir sont:

– la structure et la fonction du lysozyme de blanc d’œuf

– les propriétés physico-chimiques du lysozyme ( MM, pHi, structure spatiale….)

– la composition protéique du blanc d’œuf ( et un aperçu de l’hétérogénéité des protéines salivaires)

– la compréhension de la migration électrophorétique des protéines du blanc d’œuf dans les conditions expérimentales utilisées en AT

– la méthode de mesure d’une activité enzymatique sans pouvoir quantifier la concentration du substrat ou du produit en mol/L

– la compréhension et la mise en œuvre d’une purification d’enzyme: tableau de purification

– la compréhension et la mise en œuvre des méthodes chromatographiques et électrophorétiques

 

Documents fournis :

séance de 2 h : conception des exposés sur le lysozyme, la lysopaïne et le blanc d’œuf. lysozyme travail préliminaire

Travaux réalisés: (hors groupe 3  pas retrouvé…)

diapo lysopaine groupe SHA

paroi bacterienne antoine fred dogan

Le lysozyme présentation Groupe phages

 

 Activité de laboratoire:

Protocole AT1 :lysozyme AT1

Résultats des activités à exploiter par chacun pour son compte rendu:

résultats électrophorèse et gram

TP lysozyme spectro Ludo Fabien

étalonnage lysozyme puits masse

Utilisez ces documents pour rédiger le compte rendu à remettre jeudi 27 mars.

Bon courage à tous !